Уровень сывороточных цитокинов IL-1β и TNF-α у женщин, перенесших процедуру экстракорпорального оплодотворения.

УРОВЕНЬ СЫВОРОТОЧНЫХ ЦИТОКИНОВ IL-1β и TNF-α У ЖЕНЩИН, ПЕРЕНЕСШИХ ПРОЦЕДУРУ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОГО ОПЛОДОТВОРЕНИЯ

Сафарова Айтен Фахраддин гызы

д-р философии по медицине, заведующая отделением репродуктивной медицины, Caspian International Hospital,

Азербайджанская Республика, г. Баку

THE LEVEL OF SERUM CYTOKINES IL-1β and TNF-α IN WOMEN UNDERGOING IN VITRO FERTILIZATION

Ayten Safarova

АННОТАЦИЯ

Целью исследования явилось изучение связи между сывороточными IL-1β и TNF-α и успешной беременностью после процедуры экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). Всего в исследование был включена 131 пациентка. Они были сгруппированы на основе статуса беременности. Уровни IL-1β и TNF- α в сыворотке, полученной в момент забора ооцитов, измеряли у 76 женщин. Согласно полученным результатам, IL-1β достоверно отличался между группами с успешной беременность и без нее, в то время, как достоверных различий в уровнях TNF- α у пациенток по статусу беременности обнаружено не было.

ABSTRACT

The aim of the study was to assess the relationship between serum IL-1β and TNF- α and successful pregnancy after in vitro fertilization (IVF). A total of 131 patients were included in the study. They were grouped based on pregnancy status. Serum levels of IL-1β and TNF- α obtained at the time of oocyte pick-up were measured in 76 women. According to the results obtained, IL-1β was significantly different between groups with and without pregnancy, while there were no significant differences in TNF- α levels in patients by pregnancy status.

Ключевые слова: беременность, репродуктивные технологии, IL-1β, TNF- α, экстракорпоральное оплодотворение, бесплодие.

Keywords: pregnancy, reproductive technologies, IL-1β, TNF- α, in vitro fertilization, infertility.

Бесплодие, определяемое как неспособность забеременеть в течение 12 месяцев после незащищенного полового акта, является серьезной проблемой как современной медицины, так и общества в целом [1, стр. 3]. Причины бесплодия включают мужской фактор, овуляторную дисфункцию, аномалии матки, непроходимость маточных труб, перитонеальные факторы. Остальные 15% бесплодных пар имеют «необъяснимое бесплодие» (unexplained infertility) [2, стр. 45]. Все чаще бесплодные пары прибегают к вспомогательным репродуктивным технологиям, среди которых наиболее распространенной является процедура экстракорпорального оплодотворения (ЭКО).

На успех процедуры ЭКО влияет множество факторов: исходное состояния репродуктивной системы и гормонального профиля женщины, подготовка и рецептивность эндометрия, а также взаимодействие между матерью и плодом.  Было показано, что между иммунной системой матери и плода существуют перекрестные связи и определенное взаимодействие, реализуемое посредством иммунологических механизмов, в которых важная роль принадлежит цитокинам [3, стр. 499]. Цитокины представляют собой иммуномодулирующие молекулы, в основном продуцируемые CD4+ Т-хелперными клетками, и включают цитокины, специфичные для Th1, такие как гамма-интерферон (IFN-γ), интерлейкин 2 (IL-2), а также цитокины типа Th2 (IL-4 и IL-5). Существуют также провоспалительные цитокины, такие как IL-1, TNF-α и IL-6 [3, стр. 501].

Учитывая важность повышения эффективности ЭКО, а также необходимость выявления критериев прогнозирования успешности процедуры, представляют интерес исследования в области изучения иммунологических маркеров при проведении данного метода ВРТ.   

Целью исследования явилось определение уровня цитокинов IL-1β и TNF- α в сыворотке крови у женщин, перенесших процедуру ЭКО, и связи данных цитокинов со статусом беременности.

Материалы и методы

В период с 2020 по 2022 год в Репродуктивном отделении Caspian International Hospital в общей сложности была обследована 131 пациентка. Из них 103 (78,6%) в возрасте 19-35 лет, 28 (21,4%) – в возрасте 36-50 лет. Пациентки были сгруппированы и проанализированы на основе статуса беременности (положительная или отрицательная).

ЭКО проводилось по стандартным клиническим процедурам: индукцию овуляции проводили путем инъекции рекомбинантного фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) (ежедневно 225 МЕ), начиная с третьего дня менструального цикла. За ростом и созреванием фолликулов следили с помощью серийной вагинальной сонографии (Samsung sonoage). Хорионический гонадотропин человека (ХГЧ) (3300–10 000 МЕ) вводили после наблюдения двух фолликулов, достигших минимального среднего диаметра 17 мм. Через 36 часов после введения ХГЧ был проведен забор ооцитов посредством трансвагинальной пункции фолликулов под ультразвуковым контролем. Введение прогестерона (50 мг внутримышечно) начинали в день забора ооцитов. Эмбрионы с наилучшим морфологическим видом переносили между 3 и 5 сутками. Ультразвуковую оценку беременности проводили через 4-5 недель после переноса эмбрионов.

Цитокины определяли в сыворотке крови, полученной в момент забора ооцитов. Для измерения IL-1β и TNF- α использовались стандартные наборы ELISA (Thermofisher) и прибор STAT FAX 303 PLUS.

Статистический анализ проводился с помощью программы NCSS (Number Cruncher Statistical System). Для сравнения двух групп количественных переменных использовали U-критерий Манна-Уитни. Статистическую значимость принимали за р<0,05.

Результаты и обсуждение.

ЭКО в анамнезе наблюдалось у 39,7% (n=52) пациенток, количество случаев ЭКО колебалось от 1 до 7 (в среднем 2,04 ± 1,52 попыток).

Среди факторов бесплодия наиболее часто встречался мужской фактор 45,0% (n=59). Овариальный фактор выявлен у 26 (19,8%) пациенток, трубный фактор – у 13 (9,9%), невыясненная причина – у 19 (14,5%), бесплодие, зависящее от обеих сторон – у 10 (7,6%) женщин.

По результатам гистеросальпингограммы трубы были проходимы у 118 (90,1%) пациенток, закрыты у 13 (9,9%) женщин, принимавших участие в исследовании.

Исходы беременности были следующими: отсутствие переноса – у 7 (5,3%), отсутствие беременности – у 60 (45,8%), наличие беременности – у 56 (42,7%), нарушение менструального цикла – у 8 (6,1%) женщин.

При определении цитокинов в сыворотке крови было установлено, что уровень IL-1β составил 816,96±1474,8 pg/ml; медиана: 373,6 pg/ml при отсутствии беременности, что достоверно отличалось от такового показателя у женщин с наступившей беременностью (817,09±1753,0 pg/ml; медиана: 329,2 pg/ml; р=0,041). Схожие данные отмечены в работах Sequeira K, и соавт. (2015) [4, стр. 1623], и Kreines FM, и соавт (2018) [5, стр. 2031]. Однако при оценке содержания TNF-α в указанных группах статистически достоверной разницы выявлено не было, хотя и имело место некоторое отличие в средних значениях (73,39±138,23 pg/ml; медиана: 40,5 pg/ml, и 82,75±161,26; медиана: 46 pg/ml, соответственно; р=0,545). Очевидно, что уровень TNF-α при отсутствии успеха процедуры был несколько ниже, что отличается от некоторых литературных данных [6, стр. 238]. Тем не менее, отсутствии статистической значимости не позволяет с уверенностью говорить о возможности рекомендовать данный показатель в качестве надежного прогностического критерия.

Заключение. Результаты нашего исследования позволяют говорить о том, что имеет место связь между сывороточным IL-1β и успешной беременностью, в то время как достоверной связи TNF-α с данным показателем не выявляется, что свидетельствует о необходимости дифференцированного подхода к оценке предиктивной роли цитокинов при процедурах ЭКО.

Список литературы:

1. WHO. Infertility is a global public health issue. WHO. World Health Organization; [cited 2020 May 31]. Available from: http://www.who.int/reproductivehealth/topics/infertility/perspective/en/.
2. Петрова Е.В., Михалевич С.И. Основные этапы преодоления бесплодия с использованием программы вспомогательных репродуктивных технологий и ее модификаций. Медицинские новости. 2012; 2: 45-49.
3. Hyde KJ, Schust DJ. Immunologic challenges of human reproduction: an evolving story. Fertil Steril. 2016 Sep 1;106(3):499-510. doi: 10.1016/j.fertnstert.2016.07.1073. 
4. Sequeira K, Espejel-Núñez A, Vega-Hernández E, Molina-Hernández A, Grether-González P. An increase in IL-1β concentrations in embryo culture-conditioned media obtained by in vitro fertilization on day 3 is related to successful implantation. J Assist Reprod Genet. 2015 Nov;32(11):1623-7. doi: 10.1007/s10815-015-0573-4.
5. Kreines FM, Nasioudis D, Minis E, Irani M, Witkin SS, Spandorfer S. IL-1β predicts IVF outcome: a prospective study. J Assist Reprod Genet. 2018 Nov;35(11):2031-2035. doi: 10.1007/s10815-018-1296-0
6. Khadem N, Mansoori M, Attaran M, Attaranzadeh A, Zohdi E. Association of IL-1 and TNF-α Levels in Endometrial Secretion and Success of Embryo Transfer in IVF/ICSI Cycles. Int J Fertil Steril. 2019 Oct;13(3):236-239. doi: 10.22074/ijfs.2019.5668.